SYsteme und Komponenten der Analytischen Messtechnik

 
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Die Grundlage für die Entwicklung von ISOLEADER: (System for automated enrichment and fractionation of natural products by differential adsorption) war die Aufgabe, möglichst automatisch mit einem hohen Probenduchsatz die von diesen Mikroorganismen durch Fermentation generierten niedermolekularen Substanzen zu separieren, zu testen und zu identifizieren
(Abb. 1).
Nach der Fermentation werden die 1 Liter Kulturbrühen filtriert und anschließend die in den Filtraten enthaltenen mittelpolaren Substanzen auf semipräparativen Adsorberharz-Trennsäulen angereichert. Der Durchbruch der hydrophilen Substanzklassen wird dabei partiell auf Kartuschen mit einem speziell synthetisierten, oberflächenaktiven Absorbtionsmaterial (bioleads C pearls) gebunden. Diese differentielle Adsorption durch Kombination von zwei unterschiedlichen Säulenmaterialien erlaubt auch die zusätzliche Gewinnung der bisher wenig beachteten

hydrophilen Substanzklasse, die so pharmakologisch interessante Verbindungen wie z.B. Streptomycin enthält.

Während der Gradientenelution werden von der Adsorbersäule zwischen 20 bis 50 Subfraktionen unter UV-Detektion gesammelt. Anschließend wird diese Säule in mehreren Schritten regeneriert und aktiviert. Die Kartuschen werden einmal täglich im Batchverfahren eluiert, respektive fraktioniert. Alle Subfraktionen werden evaporiert und gewogen (Ausbeuteberechnung) und gehen dann in das pharmakologische Screening.

Die volle Automatisierung dieses komplexen Ablaufs erforderte im Zuge der Verfahrensentwicklung neben den rein schalttechnischen Problemstellungen zunehmend neue, sowohl material- als auch gerätespezifische Anpassungen und Entwicklungen.

 

 

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